蓝舌病是一种由库蠓传播的蓝舌病毒(BTV)引起的反刍动物疾病，在几年没有出现蓝舌病之后，2018年德国报告了两例新的本地病例。相反，施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus, SBV)是另一种库蠓传播的反刍动物致病性病毒，自2011年首次出现以来，一直在德国持续传播。该疾病的爆发引发了对库蠓媒介生物学的大量研究，但许多生态学细节仍不清楚。
在德国10个养殖场采用紫外诱捕器采集库蠓，每个养殖场在仓内和仓外各设1个诱蚊器。捕集器从2019年1月至12月每周运行一次，持续24小时。对收集到的蠓进行形态鉴定、计数和统计评估，重点关注蠓属库蠓属的Obsoletus群和Pulicaris复合体，认为它们含有主要的病毒载体。每个捕集器记录的温度和相对湿度与捕获的库蠓数量有关。库蠓相对丰度与家畜存在或畜牧业类型的相关性也进行了调查。
共捕获库蠓38886只，以Obsoletus类群(51.0%)和Pulicaris Complex(38.8%)居多。大多数捕获的标本是在谷仓内的陷阱中收集的。从1月底到12月的最后一周捕获Obsoletus Group个体，而从3月底到12月初捕获Pulicaris Complex个体。收集两组成员的最低平均温度分别为10.7°C和12.8°C。温度对Obsoletus Group和Pulicaris Complex的活性均有显著影响，而相对湿度仅对后者的活性有显著影响。牲畜的存在显著地影响了灰蚁群的捕获数量，但对灰蚁复合体的捕获数量没有影响。在畜舍内，在深凋落物、刮粪和板条地板饲养方式的畜舍中，被捕获的灰狼类群和灰狼类群的数量没有统计学差异。
畜棚内几乎全年都有Obsoletus群蠓，且其他库蠓潜在媒介物种相对丰富度较高，这表明如果BTV或SBV在当地传播，室内病毒传播给反刍动物的风险很高。应实施适当的结构、组织和媒介控制措施，以减少与蠓的接触。
蠓科蠓科蠓几乎分布在世界各地。已知该科的四个属(Culicoides, Leptoconops, Lasiohelea, Austroconops)含有以脊椎动物血液为食的物种[1]。库蠓属约有1300种，从传染病学的角度来看是这四个属中最重要的，包括约50种，是疾病媒介的潜在媒介。库蠓属成员传播的主要病原体包括蓝舌病毒(BTV;呼肠孤病毒科，奥比病毒属)和施马伦贝格病毒(SBV);环布尼亚病毒科，正布尼亚病毒属)，这两种病毒都可在家养和野生反刍动物中引起严重感染[1,2,3,4]。蓝舌病的症状可能包括发热、跛行、肌肉坏死和面部水肿，并导致受感染动物死亡[5,6]，而施马伦贝格病通常表现为发热、腹泻和产奶量减少等较轻的症状[7,8]。然而，在怀孕的雌性反刍动物中，SBV感染在妊娠敏感期经常导致后代畸形、死产或流产[8,9]。除了对动物健康的负面影响外，BTV的爆发还将导致对反刍动物及其产品贸易的限制。目前有针对BTV和SBV的疫苗，但除非在爆发情况下，否则疫苗的使用是限制性的[10,11]。发病率和死亡率、贸易限制和疫苗接种带来相当大的成本，并对农民和畜牧业产生很大的经济影响[8,12,13]。
2006年在中欧和北欧暴发疫情之前，BTV主要在非洲、亚洲和南欧传播，主要由库蠓(Culicoides imicola Kieffer, 1913)传播，这是一种在欧洲地中海地区发现的亚非种[14,15]。蓝舌病在中欧和北欧的暴发，表明当地库蠓种也有能力传播BTV。根据野外和实验发现，库蠓属Obsoletus组4个成员(Avaritia亚属:Culicoides Obsoletus sensu stricto Meigen, 1818);唐斯和凯特尔库蠓，1952;库蠓(Culicoides dewulfi gothebauer)， 1936;Meigen chiopterus Culicoides Meigen, 1830)和同一属的3个库蠓群成员(库蠓亚属:Linnaeus, 1758;斑点库蠓，1804;库蠓(Culicoides impunctatus Goetghebuer, 1920)随后被认为是潜在的媒介[14,16,17,18,19]。
2010年至2018年秋季，德国没有记录到BTV病例，但2018年12月在德国西南部的常规BTV监测活动中发现了两例新病例[13]。因此，限制措施开始生效，只有在动物接种了BTV疫苗或诊断检测结果为阴性(例如PCR、酶联免疫吸附试验[ELISA])的情况下，才能将它们从疫区转移到不受限制的地区[13]。
相比之下，SBV于2011年在德国和荷兰出现，作为一种全新的病毒在中欧迅速传播[7,20,21]。它显示出与Simbu血清群病毒的系统发育相似性，其中包括Akabane病毒，一种广泛分布于亚洲和非洲的库蠓传播的病毒[7,22]。由于病毒在系统发育上的亲缘关系，研究者得出结论，库蠓类也可能传播SBV[4,7,22,23,24]。随着在欧洲温带国家野外采集的Obsoletus组标本中反复检测到SBV，以及在实验室中发现C. Obsoletus和C. scoticus对病毒易感性的证据[25]，该蠓组的一些物种现在被认为是SBV的主要媒介[22]。与BTV不同，SBV从未从德国和欧洲消失，而是自2011年首次发现以来一直在周期性传播[4,9]。
尽管库蠓作为有害病原体的潜在媒介具有重要的经济意义，但在库蠓属物种的分布、生物多样性和媒介能力方面存在研究空白。迄今为止，在德国等欧洲国家对库蠓原生种的发生、物候和组成进行的研究较少[例26-32]。在这些研究中发现的物种大多是Obsoletus Group和Pulicaris Complex的成员。迄今为止，全球最重要的BTV病媒C. imicola仅在欧洲地中海国家发现[17,33]，在瑞士南部发现过一次[34]，但在更北的地区没有发现。
针对成年蠓的紫外线灯诱捕器常用于库蠓的种类分布、活动和丰度研究[35,36]。叮蚊监测通常集中在家畜养殖场，库蠓最可能出现在那里，因为它们可以找到粪便作为繁殖基质，并找到脊椎动物作为血食的宿主[37,38]。在大多数关于库蠓在农场活动的研究中，在谷仓内捕获的库蠓个体数量高于在这些结构外捕获的库蠓个体数量[26,28,33]，而在室外发现的库蠓物种多样性更大[26,30,33,39]。这些观察结果可归因于该物种的温度或咬食行为(内/外噬)[40]。
对蠓媒介种类的发生、组成和生态的认识尚不完整。然而，对蠓和蠓媒疾病的有效管理取决于详细的最新数据。
为了为德国提供最新的数据，本研究调查了德国各个农场的库蠓物种丰富度和Obsoletus群和Pulicaris Complex的相对丰度与温度、相对湿度和畜棚内外牲畜的存在的关系。并比较了不同饲养制度对库蠓发生的影响。
选取8个饲养反刍家畜(牛、羊或山羊)的农场和2个马场作为采集蠓的采样点(表1)。在这10个农场中，8个位于德国联邦勃兰登堡州，图林根州和北莱茵-威斯特伐利亚州各有一个农场(图1)。农场的选择标准是:(i)农场饲养的反刍动物或马至少10只;(ii)主要或全年在室内饲养的牲畜;(iii)取样农场之间的距离至少5公里。此外，选定的农场要么有厚厚的垃圾，要么用粪肥刮刀清理，要么有板条地板。选定的谷仓是坚固的建筑，有很大的开口，可以让飞虫随时进出。
表1 10个研究农场的特征和采集数量
图1
德国地图显示了勃兰登堡州、北莱茵-威斯特伐利亚州和图林根州10个研究农场的地理位置。字母对应于表1中列出的农场id
2019年1 - 12月，采用BG-Sentinel紫外线诱捕器(Biogents, Regensburg, Germany)采集库蠓，每周1次，持续24 h。采样是在适合蠓活动的天气条件下进行的，即没有或只有轻微的雨和风。在每个研究农场，在距地面约1.5-2米(陷阱顶部边缘)的谷仓内外各设置一个陷阱。牲口棚内的陷阱与牲畜的最大距离为5米。室外陷阱通常位于谷仓的门或其他开口旁边，但距离谷仓的最大距离为50米。同一农场的捕集器同时操作。捕获的昆虫被收集在装满75% (v/v)乙醇的烧杯中，从陷阱中取出后，在黑暗环境中储存在酒精中，直到形态鉴定。
采集的蠓与其他昆虫分离，在体视显微镜下进行鉴定(徕卡M205 C型;Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, Germany)通过翅膀图案和其他形态特征，如精子数量，遵循delsamucolle[41]和Mathieu等人[42]的识别密钥。由于某些物种(如雌性C. obsoletus和C. scoticus)的形态相似性，不可能在种水平上识别所有个体。如果个体蠓不能被确定为物种，则仅将其分配到其物种复合体或类群中。
所有库蠓均分为雌性和雄性。雌库蠓进一步分为充血(以下简称“吸血”)和非充血标本。
数据记录仪(EBI 20-TH1;Xylem Analytics公司(德国英戈尔施塔特)在每个捕集器上记录整个研究期间每小时的温度和相对湿度。记录的温度和相对湿度按日历周取平均值。按每个诱蚊器库蠓种群/群首年和末年捕获量周温度计算蚊季活动开始和结束时的阈值温度和相对湿度。
为了检验畜舍中牲畜的存在或饲养系统类型是否影响库蠓的发生，农民提供了有关牲畜和农场管理的信息。
本研究包括7个深埋垃圾仓，2个有粪便刮刀，1个有板条地板(表1)。在深埋垃圾仓中，粪便和尿液落在稻草床上。秸秆在仓内反复堆放，长期积累(如1年)[43]。在有粪便刮削器的畜棚中，牛排便和小便的地方每天被清理几次，将粪便和尿液刮入坑中[43]。在有板条地板的谷仓里，粪便通过板条消失在板条下面的坑里[43]。在后两种饲养系统中，每年清理几次的收集坑中只有少量稻草。由于其相似性，我们将这两种饲养方式组合在一起，分析其对库蠓活动的影响，并与深度凋落物仓进行比较。只有一年清理一次或两次的谷仓被纳入分析(表1)。7个深垫层谷仓中的一个每周清理一次，被排除在本分析之外。
将已鉴定的库蠓分类为Obsoletus Group(包括chiopterus、dewulfi、Obsoletus s.s、scoticus)、Pulicaris Complex(包括Pulicaris s.s、punctatus、impunctatus)和“other Culicoides”(包括所有不属于Obsoletus Group或Pulicaris Complex的库蠓)。
用泊松广义线性模型(Poisson generalized linear models, GLM)检验了捕获的Obsoletus Group和Pulicaris Complex标本的数量是否与温度、相对湿度或牲畜的存在有关。响应变量是“叮蚊计数”，由预测变量“温度”、“相对湿度”或“牲畜存在”来解释。后者是一个二元变量，当牲畜存在时设置为“1”，当牲畜不在畜栏中时设置为“0”(参见表1)。
为了分析饲养系统的影响，研究农场的不同谷仓大小和动物数量必须具有可比性。为此，采用“牲畜单位”(livestock unit, LU)参考值来调整牲畜数量，该参考值基于一个农场年平均牲畜数量[43]，便于对不同种类和年龄的动物进行汇总。此外，还计算了室内捕获库蠓的平均种群数/复合体数。这些结果除以每个农场的LU，从而保证了农场间有意义和可比较的统计数据。采用2个样本t检验比较深垫料仓与刮粪或板条地板仓调整后的畜群数。
数据在Microsoft Excel 2013 (Microsoft Corp.， Redmond, WA, USA)中进行管理，并在R版本4.1.3[44]中使用readxl[45]、tidyverse[46]和ggplot2[47]、plm[48]和pglm[49]软件包进行分析和可视化。在计算牲畜的存在是否影响捕获库蠓的数量时，考虑了地点固定效应。对于所有计算，p值< 0.05被认为是显著的。
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10个养殖场共捕获库蠓属蠓类38886只，其中仓内捕获63.1% (n=24553)，仓外捕获36.9% (n=14333)。这些数据表明，库蠓在谷仓内被捕获的频率是在谷仓外的1.7倍。
共捕获库蠓24种/种群，其中仓内捕获库蠓13种/种群，仓外捕获库蠓23种/种群(表2)。捕获库蠓中，51.0% (n=19,847)属于Obsoletus群，38.8% (n=15,072)属于Pulicaris Complex, 10.2% (n=3967)属于other库蠓。仓内外每组/复合体叮蚊的相对比例存在差异。室内捕获的Obsoletus Group和Pulicaris Complex标本多于室外，而“其他库蠓”在室外捕获的比例大于室内(图2)。
表2库蠓属在谷仓内外收集的物种
图2
灰尾鱼群、灰尾鱼群及“其他灰尾鱼”的室内及室外渔获量的相对百分比
雌鱼捕获率(94.2%，n=18689)远高于雄鱼捕获率(5.8%，n=1158);这也适用于棘轮复合体(雌性:99.1%，n=14,932;男性:0.9%，n=140)(附加文件1:表S1)。
在1月历法第4周至12月历法第52周期间，在仓内外均捕获了Obsoletus Group叮蠓(图3)。在3月底(历法第13周)至12月初(历法第49周)期间，在仓内捕获了Pulicaris Complex。从春季的第15周到秋季的第47周，在谷仓外捕获了复杂的狼斑蝶标本。热图(图3)显示了Obsoletus Group和Pulicaris Complex根据陷阱位置和日历周的平方根变换的收集编号的概述。由于收集数量分布不均匀，为了更清楚地显示不同养殖场和陷阱的捕获量之间的差异，采用了平方根变换表示[50]。
图3
热图显示每个日历周内每个农场的Obsoletus Group和Pulicaris Complex标本的平方根变换收集数量(列)。栏内和栏外的陷阱位置按行显示
其中，莱陈(Lychen)和海德塞(Heidesee)分别捕获了63.9%(69.1%)和25.4%(20.3%)的黄颡鱼种群(表3)，和63.9%(69.1%)的黄颡鱼种群(表3)。这两个养殖场黄颡鱼种群的捕获数量均高于黄颡鱼种群(表3)。特别是在Platkow的第30和31日历周以及Heidesee的第26和32日历周，Pulicaris Complex的数量远远超过Obsoletus Group的数量(图3)。
表3在各自的研究农场捕获的畜棚内外的黄颡鱼群和黄颡鱼群的百分比和相对百分比
共捕获了来自Obsoletus群的794只血食性个体和来自Pulicaris群的958只血食性个体，包括每个捕获点至少1只血食性雌性个体(表4)。大多数血食性雌性个体(92.4%)在室内捕获，其中Platkow记录的数量最多，其次是Eichelborn和Lychen(表4)。
表4在各个研究农场的畜栏内外捕获的Obsoletus Group和Pulicaris Complex的吸血雌性数量
雌虫总数、血食雌虫和雄虫群的数量全年都在变化，无论是在仓内还是仓外，大多数个体在5月至10月之间被捕获(表5)。随着温度的降低，收集到的个体数量也在减少。在5月的第20日历周和8月的第35日历周之间记录了最高的收集数量(图4)。第一个和最后一个季节的Obsoletus群捕获温度为10.7°C(最低3.9°C，最高23.2°C)，相对湿度约为75.6%(最低61.0%，最高96.7%)。Pulicaris Complex标本的平均阈值温度为12.8℃(最小4.4℃，最大24.9℃)，平均相对湿度约为78.3%(最小53.0%，最大99.8%)。周温度和相对湿度对库蠓捕获总数的影响无统计学意义(t=1.80367、t=1.65711);P > 0.05)。Obsoletus类群的相对丰度与温度呈极显著相关(t=3.40309, P < 0.001)，与相对湿度无显著相关(t=1.93182, P=0.5338227)。相对丰度与温度、相对湿度均呈显著相关(t=4.10764、3.47027);P < 0.0001)(表6)。
表5每月Obsoletus Group和Pulicaris Complex的雄性/雌性，牲口棚内外(所有研究农场)
图4
10个养殖场捕获的库蠓总数与每个捕集器测得的平均温度的关系
表6非生物预测变量“温度”和“相对湿度”的系数和统计显著输出，由泊松广义线性模型计算
牲畜的存在对Obsoletus Group (t=44.368, P < 0.0001)和' other Culicoides ' (t=- 36.004, P=< 0.0001)的相对丰度有显著影响，但对Pulicaris Complex的相对丰度没有显著影响(t=1.229, P=0.219)(表7)。
表7通过泊松广义线性模型计算的预测变量“牲畜存在”的系数和统计显著输出。的响应Nse变量是在所有研究农场的谷仓内收集到的蠓的总和
在有深层垃圾的谷仓和有刮粪器或板条地板的谷仓之间，未发现Obsoletus Group、Pulicaris Complex和“其他库蠓”的相对丰度有显著差异(附加文件2:表S2)。
通过分析系统收集的数据，本研究调查了德国10个农场的库蠓群(culicoid Obsoletus Group)和波蠓群(Pulicaris Complex)的季节性活动。
虽然在不同的研究中，在谷仓内外捕获的库蠓个体数量不同，但大多数作者报告在谷仓内外捕获的库蠓个体数量高于在谷仓外捕获的库蠓个体数量[26,28,33]。本研究也得到了同样的结果(63.1%的个体被困在室内)，其内外比为1.7:1，与Kameke等[31]的结果(1.6:1)大致一致。
本研究共捕获库蠓23种/种群，几乎是棚内(13种/种群)的两倍。这一结果与Baldet等人[26]、Romón等人[33]和Sarva?ová等人[39]报道的结果一致，他们也分别在法国北部、西班牙北部和斯洛伐克东部记录了谷仓外高于谷仓内的物种丰富度。这些研究中提到的物种数量各不相同，本研究中确定的物种数量介于两者之间。然而，在目前的研究中，库蠓的种类数量实际上可能比确定的要多，因为并非所有的“其他库蠓”都可以在形态上识别到物种水平。事实上，除了Obsoletus类群和Pulicaris复合体外，“其他库蠓”可能还包括有助于病毒传播的物种。例如，采集的标本中含有细小库蠓(在室内和室外捕获)，此前已证明它是一种有效的btv病媒[51,52]。其他研究也讨论了“其他库蠓”物种作为潜在的媒介[53,54,55]，但证据仍然缺失。
各种研究的作者提出了一个问题，即捕光器捕获的数量是否不足以代表某些“其他库蠓”物种的丰度[55,56,57]。如果是这样的话，这一群体的媒介物种可能在库蠓传播疾病的发生和传播中发挥比通常认为的更重要的作用。因此，对这类“其他库蠓”的生态学研究应投入更多的精力。
尽管本研究记录到的物种多样性很高，但灰蚁群和灰蚁复群的物种，特别是灰蚁/灰蚁。室内和室外的优势种分别为褐尾小蠹、纹皮小蠹和点毛小蠹。因此，收集到的标本中有一半以上属于Obsoletus类群，而近40%属于Pulicaris Complex标本。中欧和北欧的研究证实了Obsoletus类群物种的总体相对丰度较高[14,28,31,32,58]，占总渔获量的90%以上[29]。然而，在本研究中捕获的Obsoletus Group个体的比例低于其他调查[14,28,29,31,32]，这可能是由于在10个研究农场中的两个(Heidesee和Platkow)在几周内捕获了大量的Pulicaris Complex个体。
以往的研究表明，毛轮复合体在特定位置[59]或特定时间占优势[28,29,39]。Mehlhorn等人[29]认为，在特定时期，大量的狐獴复合体个体与该复合体的许多个体同时孵化相吻合。这一假设可能得到斯洛伐克的一项研究的支持，在该研究中，在室内和室外的单个诱捕日中捕获了非常多的针状棘虫(Pulicaris Complex的一种)[39]。根据本研究的结果，Pulicaris Complex标本在局部和时间上高发生率的可能解释似乎是对温度和相对湿度的强烈依赖，而Obsoletus Group的活性仅与温度相关，其他研究也报道了[32,39,60]。为了确定刺毛蕨复合体个体出现的局部和时间高峰受限的真正原因，需要进一步的数据。本研究中未调查的因素，如土地覆盖、土壤类型、土壤湿度或植被，可能是原因。
据报道，Obsoletus Group的物种倾向于嗜内性，而Pulicaris Complex的物种C. Pulicaris和C. punctatus则倾向于嗜外性[26,40,61]。我们的结果只是部分支持这一观点，因为相当多的Obsoletus Group个体是在室外捕获的，而许多Pulicaris Complex个体是在室内捕获的。然而，这些矛盾的发现可能是由于谷仓的开放式结构为蠓的进出提供了便利。Meiswinkel等人[40]也强调，他们研究中使用的建筑并不能阻止库蠓进入室内。此外，有研究表明，一定比例的马尾蚴种群在丰度高峰时可能会采取嗜内行为[39]。
在本研究中，大部分室内采集的狐尾虫个体分布在Platkow和Heidesee两个特定养殖场。在其他研究农场中，捕获到的灰狼复群个体相对较少，没有主要集中在室外或室内的趋势。根据文献[31,56,62]，牲畜和畜牧业的类型可能影响了该建筑群的个体收集数量，尽管这两个参数在Heidesee和Platkow地点之间也存在差异(Heidesee:马场，10只动物;Platkow:养牛场，820头牛)。此外，在任何其他养牛或养马的研究农场中，都没有观察到在单个日子里捕获如此高数量的毛轮虫标本。因此，在本研究中包括的农场中，除饲养的动物种类外，其他因素可能会影响狐獴复合体的行为。不同类型的谷仓结构或农场周围的景观可能会影响库蠓的丰度和活动[31,63]。然而，这些因素不足以解释高相对丰度或某些物种在季节某些时期的行为。
库蠓种类的活动在一年内有所不同。例如，Clausen等人[28]发现德国农场在一年中的不同时间活动水平不同，毫不奇怪，观察到冬季Obsoletus Group和Pulicaris Complex的活动减少。Mehlhorn等人[29]也注意到，尽管活动减少，但在冬季捕获了C. obsoletus标本。在这种情况下，可能存在的无矢量周期受到质疑[28]。在目前的研究中，Obsoletus集团在一年中的所有月份都在室内和室外活动。Pulicaris Complex的个体从3月开始活跃，但也在寒冷的月份被捕获，直到12月初。因此，我们的数据支持低矢量周期的存在，而不是无矢量周期。
一般采用紫外诱捕器捕获蠓[29,32,35]。使用这种方法，雌性的代表比雄性多[26,32,64]，但同时从媒介生态学的角度来看，雌性更重要。与其他研究一样[26,39,40]，在本研究中，Obsoletus组的吸血雌性主要被困在室内。虽然这些雌性大多是在夏季捕获的，Sarva?ová等人[39]报告说，在每年的这个时候，畜棚中吸血雌性的数量减少到可以忽略不计的水平。这些作者认为，这种减少是由于牲畜被饲养在户外和Obsoletus Complex个体的自食行为造成的。在室内捕获的血食性Pulicaris Complex个体数量超过Platkow的Obsoletus Group，这一观察结果再次与所描述的该复合体的外食行为相矛盾[26]。在我们研究的几乎所有农场中，即使在夏夜，牲畜也被关在室内，这可能导致更多吸血的雌性蠓被困在室内。一般来说，谷仓为库蠓提供了隐蔽的栖息地，在那里它们不会直接暴露在风、降水和不利的温度下[39]。这些环境参数可能会降低库蠓在室外的活动[63]，而待在室内的个体仍保持活跃，容易被捕获[39]。
在本研究期间，Obsoletus集团和Pulicaris综合渔场的第一次捕捞分别是在1月底和3月底进行的。蝶轮复合体个体的活动延迟可能与较高的阈值温度有关，本研究计算的阈值温度为12.8°C。相比之下，Kameke等人[31]测量的毛蜱复合体种C. punctatus和C. Pulicaris的阈值温度为10.9℃[31]。由于缺乏数据，这些作者无法计算Obsoletus群的阈值温度。然而，基于对Obsoletus群在季节中活动较早的观察，他们得出结论，Pulicaris Complex的阈值温度必须高于Obsoletus群[31];我们的结果似乎证实了这一假设。
Silbermayr等人[65]将Culicoides属的出现与天气数据联系起来，并确定了奥地利的温度和相对湿度的显著影响，我们只能确认Pulicaris Complex，但不能确定Culicoides属的总体情况，也不能确定Obsoletus Group的情况。然而，在许多其他研究中，所有库蠓种被视为一个整体[32,39,62]。进一步证明库蠓种类丰度与温度和相对湿度之间存在相关性的研究集中在德国没有出现的库蠓物种上，如C. imicola[66,67]，或在其他气候带[65,67]或在恒定的实验室条件下进行的研究[66,68]。
本研究还能够从统计数据上证明，“牲畜的存在”影响了Obsoletus群捕获的个体数量。与此相反的是，“牲畜的存在”似乎并不会影响到普利卡里斯复合体的活动。这一结果与蒲顶星复合物的狭窄行为一致[69]。
最后，研究了每年清除一次或两次的深层垃圾以及粪便刮刀或板条地板清洁系统对库蠓存在的影响。在两种放牧方式之间，黄颡鱼群和黄颡鱼群的渔获量均无显著差异。至少对于Obsoletus类群来说，这一结果令人惊讶，因为该类群的一些成员被描述为更喜欢粪便和粪便来促进幼虫发育[37,70,71]。然而，在本研究中检查的配备了粪便刮刀或板条地板的农场中，粪便并没有完全从谷仓或其附近清除。据农民说，这些粪便被储存在谷仓下面或附近的坑里，或者落在谷仓板条地板下面的露天坑里。因此，在坑被清理干净之前，粪便仍然可以作为繁殖的栖息地。然而，由于仅使用了9个诱捕器和养殖场的结果进行分析，因此需要进一步调查，以对养殖制度是否影响库蠓的发生做出有根据的声明。
库蠓病媒在仓内外的季节性活动持续时间较长，说明对库蠓传播风险进行时空差异性分析的重要性。它还强调了需要进一步研究的细节。此外，在所有农场均发现寻找宿主的库蠓雌虫，这表明，只要病毒在研究区域传播，就可以推断出病毒的广泛传播和疾病风险。
本研究采集的标本大多属于库蠓属的Obsoletus群和Pulicaris Complex，它们被认为是SBV和BTV的主要媒介。在本研究中调查的所有牲畜养殖场都捕获了这两个物种群/复合体，这突出了如果病毒传入德国，病毒传播的风险。与Pulicaris Complex相比，Obsoletus Group个体的活动阈值温度较低，捕获时间为1月至12月。在畜棚内外都捕获了Obsoletus群和Pulicaris群的个体，这表明即使在冬季，病毒也可能在畜棚内和周围传播。由于库蠓在5月下旬至8月期间的采集数量最多，因此传播风险似乎在此期间最高。然而，也观察到冬季活动，应该进行更密切的研究。此外，还应考虑进一步的调查，以解释在某些时间和地点突然高发生率的原因，并研究不属于Obsoletus类群和Pulicaris复合体的库蠓物种的生态学和流行病学作用。
用紫外灯诱捕器在所有研究农场的谷仓内外捕获库蠓和其他蠓的数量和百分比(括号内)。
两个样本的t检验比较了深埋垃圾、刮粪器和板条地板的库蠓捕获数量的无显著性结果。
下载原文档：https://link.springer.com/content/pdf/10.1186/s13071-023-05920-z.pdf
